噻唑兰MTT的正确配置方法

噻唑兰MTT的正确配置方法

上海信帆生物供应噻唑兰MTT，产品质量稳定，价格低廉！

称取25mg MTT粉末溶解在5mg/ml的工作液，4℃保存。一周内使用。

产品参数

其它名称：噻唑兰；噻唑蓝溴化四唑；3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide

298-93-1

分子式：C18H16BrN5S          

分子量：  黄色至橙色粉末

纯度：  >98%

溶解性：溶于水(20 mg/ml)，缓冲盐溶液(5 mg/ml)

结构式：

噻唑兰（MTT是一种可接受氢离子的化合物染料，带正电荷，具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT-甲臜结晶，而死细胞不具有此功能。甲臜结晶是不能穿透细胞膜，因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。甲臜结晶可用570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量与活细胞数目成正比，用以评估细胞存活状况。

使用方法：

1：接种细胞：用含10％胎牛血清的培养基配制单个细胞悬液，以每孔1000-10000个细胞量接种到96孔板，每孔体积200ul。

2: 培养细胞：正常培养及加药等处理细胞。

3：呈色：培养及处理完毕后，PBS清洗每孔细胞后，每孔加MTT溶液20ul（5mg/ml用PBS配制，pH=7.4)，继续培养箱孵育4 h。

4： 终止培养：小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，振荡10min，使结晶物充分融解。

5：比色：490nm酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。

噻唑兰MTT的正确配置方法